">Triple Sugar Iron agar)TSI)

این محیط  تشکیل شده از سه قند گلوکز (1/0 % ) ــ  سوکروز (1 % )  و لاکتوز (1 % ) و همچنین پپتین و سولفات آهن .

این محیط، محیط کشت جامد است که در لوله ریخته شده است و نسبت به حالت محیط زاویه دار فیکس شده است. به چنین محیط هایی محیط Slant  ( کج ) می گویند. علت استفاده از چنین محیط هایی ، افزایش سطح کشت تا دو برابر  است .

این محیط یک محیط کشت  سه کاره است یعنی می توانیم  سه تست افتراقی( A&B&C ) را با این لوله انجام می دهیم .

A.      تخمیر لاکتوز

B.     تولید SH2  

C.    تولید گاز ( مثل N2  و H2  و ... )

Aتخمیر لاکتوز: یک تست بسیار مهم و کلیدی برا ی تفریق گونه های باکتریاسه ها در بین خود و با سایر باکتری ها است.

3 شکل تخمیری  در روش کشت TSI  مشاهده می شود.

این نتایج را به صورت کسر بیان می کنیم .که در این کسرها صورت slant  را بیان می کند  و مخرج استوانه را.

اگر محیط کشت شما زرد رنگ شد به دلیل تولید اسید در محیط است .در واقع در محیط های اسیدی فنول رد؛ زرد رنگ و در محیط های قلیایی قرمزمی شود. در روش های تخمیری به دلیل تولید اسید ما این محیط را زرد رنگ مشاهده می کنیم.

* محیط کشت TSI  هموژن است یعنی ترکیبات استوانه با slant  یکسان است.

1. اگر Acid/Acid  شد یعنی هم slant  ( صورت ) و هم استوانه ( مخرج ) زرد رنگ شده اند  نتیجه می گیریم که باکتری قدرت تخمیر هم گلوکز و هم لاکتوز را دارد.

2. اگر Alk/ Alk  شد یعنی هم slant  ( صورت ) و هم استوانه ( مخرج ) قرمزرنگ شده اند  نتیجه می گیریم که باکتری قدرت تخمیر هیچ یک از دو قند گلوکز و لاکتوز را ندارد.

3. اگر  Alk/Acid  شد یعنی slant  ( صورت ) قرمز(تر) شد ولی استوانه ( مخرج ) زرد رنگ شد؛  نتیجه می گیریم که باکتری قدرت تخمیر گلوکز را دارد ولی قدرت تخمیر  لاکتوز را ندارد.

مکانیسم این باکتری چنین است : ابتدا گلوکز را تخمیر می کند پس در ابتدا هم استوانه و هم slant  زرد رنگ می شود اما بعد از اتمام گلوکز چون باکتری قادر به تخمیر لاکتوز نیست به سراغ پپتین ها می رود و با اکسیداسیون پپتین ها باعث ایجاد بی کربنات می شود ؛؛ خوب چون در سطح slant  اکسیژن داریم محیط slant از رنگ زرد به رنگ قرمز تغییر رنگ می دهد اما در استوانه چون خبری از اکسیژن  نیست (عدم اکسیداسیون پپتین ها ) تغییر رنگی را مشاهده نمی کنیم. زرد  باقی می ماند.

تمام این مراحل اتفاق می افتد و ما در نهایت استوانه را زرد رنگ و slant را قرمزمی بینیم.

B)تولید :SH2 معرف این تست سولفات آهن است.سولفات آهن در صورتی که با H2S ترکیب شود ترکیبی سیاه رنگ می دهد. پس چنانچه باکتری H2S  + باشد رسوبی سیاه رنگ را در لوله مشاهده می کنیم.

C) تولید گاز:

بعضی از باکتری ها در مسیرهای متابولیکی شان دست به تولید گازهایی از قبیل N2  و H2  و... می زنند . ما برای تشخیص این نوع باکتریها کار مشکلی را نداریم . اگر محیط از لحاظ شکل سالم بود؛ تولید گاز – است ولی اگر محیط تکه تکه و حفره حفره شده بود تولید گاز + است. در مواردی یک حباب بزرگ مشاهده می کنید که بیانگر تولید فراوان گاز بوده است. (تولید گاز شدیداً + )